陆光祖，字与绳，平湖人。祖父陆淞，父亲陆杲，都是进士。陆淞任光禄卿。陆杲任刑部主事。陆光祖十七岁时，与父亲同时在乡试中举。不久考中嘉靖二十六年(1547)的进士，授职为睿县知县。兵部尚书赵锦发布命令让京郊的百姓修筑边墙，陆光祖称不利。赵锦恼怒，弹劾他。陆光祖向巡抚陈述，请求发放雇工费，百姓才安定。郡王抢夺民产，陆光祖依法加以制裁。
他调任南京礼部主事，因急事请假回乡。回任后补祠祭主事，历任仪制朗中。严讷任尚书，向来器重陆光祖，他的提议没有不批准的。等到严讷改任吏部职，调陆光祖担
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